|
DOI: 10.7256/2453-8809.2018.4.28066
Received:
19-11-2018
Published:
15-02-2019
Abstract:
One of the most frequent pathologies that a veterinarian encounters in practice is dermatitis of various etiologies. According to statistics, the number of visits of patients with dermatological diseases increases every year. One of the factors provoking the susceptibility of an animal to allergens is the current environmental conditions.Treatment of skin infections and allergies in domestic animals remains a problem that needs to be addressed. It is known that an important component of the pathogenesis of allergic dermatitis accompanied by further infectious, in particular bacterial dermatitis, is the cytokine factor. The aim of the work is to study the level of the main classes of cytokines in bacterial eczema and the effect of Apoquel on the change in these indicators.
Keywords:
cytokines, interleukins, immunity, dermatitis, Oclacitinib, Eczema, TNFα, Pyrogens, Allergy, Lymphocytes
Одной из самых частых патологий, с которыми ветеринарный врач сталкивается в практике, являются дерматиты различной этиологии.
По статистике количество обращений пациентов, имеющих дерматологические заболевания, с каждым годом становится все больше. Одним из факторов провоцирующих восприимчивость организма животных к аллергенам являются современные экологические условия.
Лечение кожных инфекционно-аллергических заболеваний домашних животных пока остается проблемой, требующей решения.
Известно, что важной составляющей патогенеза аллергодерматитов сопровождающимся в дальнейшем инфекционным, в частности бактериальным дерматитов, является цитокиновый фактор.
Целью данной работы было изучение уровня основных классов цитокинов при бактериальной экземе и влияние на эти показатели препарата Апоквель.
Материалы и методы.
Обследовано 12 собак разного пола, в возрасте от 1 до 7 лет. Всем животным было проведено цитологическое исследование (кокки, нейтрофилы, активный фагоцитоз) + посев – Staphylococcus intermedius. У всех животных диагностирован бактериальный дерматит (с клиническим проявлением в виде мокнущей экземы).
Все животные получали общепринятое лечение, включающее антибиотикотерапию Синулокс в дозе 20 мг/кг на 14 дней, местные обработки Хлоргексидином 2-4% на 14 дней, Омега-3 1 капсула на 10 кг в течение 21 дня.
5 собак получали только общепринятую терапию и составили контрольную группу (группа 1). 7 собак дополнительно к основной терапии получали препарат Апоквель (Группа 2). Препарат применяли в дозе 0,5 мг на 1 кг массы животного 2 раза в сутки, в течение 7 суток.
При поступлении и через 7 суток от начала лечения в периферической крови определяли уровень основных классов про- и противовоспалительных интерлейкинов (IL-1, IL-4, IL-17, TNFα, IFNγ).
Для определения уровня цитокинов сыворотки крови использовали соответствующие наборы ИФА (Canine Interleukin 1, IL-1 ELISA Kit; Dog Interferon γ, IFN-γ ELISA Kit; Dog interleukin 4, IL-4 ELISA Kit; Dog Tumor necrosis factor αTNF-α ELISA Kit, Cusabio, US; IL-17 Canine IL-17/IL-17A Quantikine ELISA Kit, R&D Systems, Inc.USA, Canada). Для учета результатов использовали многофункциональный микропланшетный считыватель Synergy HT (BioTek Inc, США).
Статистический анализ проводили с использованием статистического программного обеспечения, STATISTICA версия 10 (StatSoft.Inc., 2011)
Результаты исследования представлены в таблицах 1-5.
Таблица 1. Уровень IL-1 в периферической крови (пг/мл)
|
|
|
До лечения
|
После лечения
|
|
Норма (n=30)
|
11,6±1,13
|
|
|
|
Группа 1 (n=5)
|
|
18,7±0,26*
|
10,43±2,15
|
|
Группа 2 (n=7)
|
|
19,5±1,44*
|
12,17±1.11
|
Примечание:
* - Статистически достоверно (Р≤ 0,05) по сравнению с нормой.
Таблица 2. Уровень IL-4 в периферической крови (пг/мл)
|
|
|
До лечения
|
После лечения
|
|
Норма (n=30)
|
7,44±0,91
|
|
|
|
Группа 1 (n=5)
|
|
2,15±1,22*
|
6,45±0,78
|
|
Группа 2 (n=7)
|
|
2,32±1,31*
|
6,76±0.63
|
Примечание:
* - Статистически достоверно (Р≤ 0,05) по сравнению с нормой.
Таблица 3. Уровень IFNγ в периферической крови (пг/мл)
|
|
|
До лечения
|
После лечения
|
|
Норма (n=30)
|
107,6±1,56
|
|
|
|
Группа 1 (n=5)
|
|
414,6±22,55*
|
196,46±22,42#
|
|
Группа 2 (n=7)
|
|
427,5±27,2*
|
103,5±24,5
|
Примечание:
* - Статистически достоверно (Р≤ 0,05) по сравнению с нормой.
# - Статистически достоверно (Р≤ 0,05) по сравнению с группой 1
Таблица 4. Уровень TNFα в периферической крови (пг/мл)
|
|
|
До лечения
|
После лечения
|
|
Норма (n=30)
|
0,33±0,78
|
|
|
|
Группа 1 (n=5)
|
|
4,28±0,68*
|
1,74±0.76*
|
|
Группа 2 (n=7)
|
|
3,99±0,46*
|
0,55±0,96
|
Примечание:
* - Статистически достоверно (Р≤ 0,05) по сравнению с нормой.
Таблица 5. Уровень IL-17 в периферической крови (пг/мл)
|
|
|
До лечения
|
После лечения
|
|
Норма (n=15)
|
5,33±2,44
|
|
|
|
Группа 1 (n=5)
|
|
98,45±9,44*
|
47,34±29,22*
|
|
Группа 2 (n=7)
|
|
106,76±12,59*
|
34,78±16,77*#
|
Примечание:
* - Статистически достоверно (Р≤ 0,05) по сравнению с нормой.
# - Статистически достоверно (Р≤ 0,05) по сравнению с группой 1.
Уровень интерлейкина 1 (IL-1, табл. 1) при поступлении был достоверно, по сравнению с нормой, повышен у всех животных. После проведения терапии количество цитокина нормализовалось.
Концентрация интерлейкина 4 (IL-4, табл.2) была снижена у пациентов обеих групп при поступлении и также нормализовалась после лечения.
Количество интерферона гамма (IFNγ, табл.3) резко повышалось в обеих группах при поступлении. После лечения уровень IFNγ нормализовался в группе 2 и снижался, но не достигал нормы в группе 1.
Уровень фактора некроза альфа (TNFα, табл. 4) в крови животных обеих групп был повышен при поступлении у всех животных. После лечения нормализовался в группе 2 и имел выраженную тенденцию к нормализации в группе 1, однако, эти изменения достоверно отличались от нормы.
Уровень интерлейкина 17 (IL-17, табл.5) при поступлении был повышен у животных обеих групп. Через неделю показатели также были повышены относительно нормы, однако в группе 2 тенденция к снижению была достоверно более выражена, чем в группе 1.
Одно из наиболее существенных свойств IL-1 — это стимуляция пролиферации антиген чувствительных Т-лимфоцитов через усиление экспрессии рецепторов и индукции синтеза IL-2 и IL-4, формирование местной воспалительной реакции и пирогенного ответа на уровне организма при инфекционном поражении [1, с. 100].
Увеличение продукции ИЛ-1 полученное в нашем исследовании, дает возможность предположить гиперактивацию иммунного ответа и воспаления.
IL-4 является плейотропным регулирующим фактором, изменение уровня которого свидетельствует о степени напряжения воспалительных реакций, косвенно – о процессах гемопоэза и аллергии [6].
В рассматриваемом случае снижение ИЛ-4 указывает на относительный дефицит гуморальных иммунных реакций и преобладании клеточных цитотоксических. То есть баланс Th1/Th2 зависимого иммунного ответа сдвинут в сторону провоспалительных цитокинов.
IFN-гамма совместно с другими цитокинами принимает участие в регуляции активности Th1-клеток и цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) [8].
Повышение уровня IFN-гамма у животных при поступлении отражение активации (а возможно и гиперактивации) иммунного ответа. Поскольку IFN-гамма обладает свойствами синергизма, можно предположить, что на фоне повышения концентрации провоспалительных цитокинов, их суммарный эффект увеличивается и это, в свою очередь, повышает вероятность развития нежелательных побочных эффектов (гиперактивность воспалительных реакций, дисбаланс регенераторных процессов).
TNFα индуцирует некроз инфицированных вирусом и опухолевых клеток. Эффект TNFα усиливается в присутствии интерферона [1;2].
В рассматриваемом случае повышение уровня TNFα можно связать с активирующим влиянием антигенов микроорганизмов и опосредованным действием других цитокинов, в частности INFγ.
Интерлейкин-17 (IL - 17) является провоспалительным цитокином, секретируемым активированными Т-клетками, важное звено в защите хозяина от внеклеточных бактерий и грибов [7]. Он принимает активное участие в иммуноопосредованных воспалительных процессах с эпидермальной гиперплазией [3].
Интерлейкин 17 – один из ключевых цитокинов в патогенезе зуда[4].
В рассматриваемом случае повышение уровня интерлейкина 17, равно, как и других провоспалительных цитокинов, указывает на активацию цитотоксичности и Th1 иммунного ответа. Кроме того, повышение концентрации IL-17 несомненно обусловливает и формирование дисрегенераторных процессов и зудящих дерматозов.
Применение препарата Апоквель во многом способствовало быстрейшей нормализации иммунопатологических сдвигов, что коррелировало с более выраженными положительными клиническими данными.
(Oclacitinib, торговая марка Apoquel) - это синтетический циклогексиламино пирролопиримидиновый ингибитор Янус киназы, селективный для JAK1 [5]. Он блокирует трансдукцию сигнала активации JAK киназы и, таким образом, подавляет экспрессию провоспалительных цитокинов. Следует указать, что Оклацитиниб – цитостатик и его применение требует повышенной осторожности в отношении генерализации инфекционного процесса. В рассматриваемом случае использование препарата проводилось на фоне терапии антибиотиками.
Таким образом, при возникновении инфекционной экземы у собак наблюдается дисбаланс цитокинов сыворотки крови, проявляющийся в увеличении уровня IL-1, IL- 7, IFNγ, TNFα, снижении концентрации IL-4. То есть наблюдаются изменения, характерные для дисбаланса Th1/Th2 зависимого иммунного ответа в сторону провоспалительных цитокинов. То, в свою очередь, обусловливает гиперактивность воспалительных реакций, дисбаланс регенераторных процессов, развитие зудящего дерматоза. Использование ингибитора Янус киназы 1(JAK1) в значительной степени способствовало нормализации иммунологических показателей, что коррелировало с клиническим улучшением.
(Oclacitinib, торговая марка Apoquel) является перспективным иммунотерапевтическим препаратом при гиперактивации Th1 иммунного ответа.
Учитывая цитостатическое действие Оклацитиниба, использование препарата должно проводиться с соблюдением соответствующих предосторожностей в отношении инфекций, в частности, по показаниям, в сопровождении с антибиотикотерапией.
References
1. Abramov V.V., Abramova T.Ya., Gontova I.A., Kozlov V.A., Markova E.V., Poveshchenko A.F., Rebenko N.M., Solov'eva I.G., Sorokin O.V. Zolotaya seriya natsional'nykh nauchnykh dostizhenii. Osnovy neiroimmunologii.-Moskva: 2004.-100 s.
2. Kozlov V.A. Gomeostaticheskaya proliferatsiya limfotsitov v aspekte immunopatogeneza razlichnykh zabolevanii. // Immunologiya. 2006. T.27, №6. S. 378-382.
3. Ann Sophie Lønnberg, Claus Zachariae, and Lone Skov. Targeting of interleukin-17 in the treatment of psoriasis. Clin Cosmet Investig Dermatol. 2014; 7: 251–259.
4. Dhand A1, Aminoff MJ. The neurology of itch. Brain. 2014 Feb;137(Pt 2):313-22. doi: 10.1093/brain/awt158. Epub 2013 Jun 22.
5. Gonzales, AJ; Bowman, JW; Fici, GJ; Zhang, M; Mann, DW; Mitton-Fry, M (August 2014). "Oclacitinib (Apoquel®) Is a Novel Janus Kinase Inhibitor with Activity Against Cytokines Involved in Allergy". Journal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics. 37 (4): 317–24.
6. Lenarczyk A., Le T.T., Drane D., Malliaros J., Pearse M., Hamilton R., Cox J., Luft T., Gardner J., Suhrbier A. ISCOM based vaccines for cancer immunotherapy // Vaccine. 2004. V. 22, N 8. P. 963-974.
7. Moseley TA, Haudenschild DR, Rose L, Reddi AH. Interleukin-17 family and IL-17 receptors. Cytokine Growth Factor Rev. 2003 Apr;14 (2):155-74.
8. Song R, Kim J, Yu D, Park C, Park J: Kinetics of IL-6 and TNF-α changes in canine models of sepsis induced by endotoxin. Vet Immunol Immunopathol, 146, 143-149, 2012. DOI: 10.1016/j.vetimm.2012.02.008.
|
© 1998 – 2024 Nota Bene. Publishing Technologies. NB-Media Ltd.
